假病毒是指(zhǐ)一種(zhǒng)反轉(zhuǎn)錄(lù)病毒(dú)整合(hé)了另(lìng)外一種(zhǒng)病毒的囊(náng)膜(mó)糖(táng)蛋(dàn)白,從而形成(chéng)的具有(yǒu)外源性(xìng)病毒囊膜(mó),而(ér)基因(yīn)組(zǔ)仍保持著反轉錄病(bìng)毒本(běn)身(shēn)基因(yīn)組(zǔ)特性的病毒。假病毒(dú)用帶(dài)有一種(zhǒng)病毒外膜(mó)蛋(dàn)白基(jī)因(yīn)的質(zhì)粒與(yǔ)帶有(yǒu)另(lìng)一種病毒骨架(jià)基因的質(zhì)粒(lì)共(gòng)轉(zhuǎn)染(rǎn)到(dào)包裝細(xì)胞(如293T細胞(bāo))中,外(wài)膜(mó)蛋(dàn)白基(jī)因(yīn)在(zài)包(bāo)裝細胞(bāo)表麵表達(dá)出(chū)外(wài)膜(mó)蛋白,另(lìng)一(yī)種(zhǒng)病毒(dú)的基(jī)因在包(bāo)裝細(xì)胞(bāo)中(zhōng)轉(zhuǎn)錄(lù)翻(fān)譯組裝成(chéng)病(bìng)毒顆粒,病毒顆粒(lì)出芽(yá)時(shí)會被細(xì)胞表麵表達的(dí)外膜蛋(dàn)白(bái)所包(bāo)裝,即(jí)形成假病毒。假(jiǎ)病(bìng)毒具(jù)有(yǒu)以下(xià)優勢:
①具(jù)有單輪感(gǎn)染特(tè)性,生物(wù)安全性較(jiào)高(gāo)。
假病毒核(hé)酸(suān)分子上編碼囊(náng)膜(mó)蛋(dàn)白的基(jī)因(yīn)被(bèi)修(xiū)飾掉(diào),因(yīn)此不(bù)具(jù)備自我復製能力(lì),隻能進行單一周期的(dí)侵(qīn)染,不(bù)能再組裝成病(bìng)毒(dú)顆粒。
②在係(xì)統(tǒng)中(zhōng)可(kě)引(yǐn)入(rù)報告基(jī)因,便於(yú)檢(jiǎn)測和分(fēn)析。
可引入的報告基因主要有分(fēn)泌型胎(tāi)盤(pán)磷酸酯(zhǐ)酶(SEAP),β一(yī)半乳(rǔ)糖(táng)苷(gān)酶(Lac Z),β一葡萄糖苷(gān)酸酶(GUS),螢(yíng)火蟲熒光(guāng)素酶(LUC)和綠色熒(yíng)光蛋白(bái)(GFP)等(děng),便於進行定性和(hé)定(dìng)量分析(xī)。
③製備過程(chéng)相對(duì)簡(jiǎn)單(dān)快速,降低了病毒(dú)變異(yì),減少(shǎo)了檢測時間(jiān)。
④宿主(zhǔ)範圍廣泛,易被(bèi)濃(nóng)縮(suō)成高滴度(dù),穩(wěn)定性及轉(zhuǎn)染效率高。
在(zài)研究致病性(xìng)高,並目(mù)不(bù)易體外(wài)培養的病毒時,製備(bèi)假病毒是(shì)一種(zhǒng)行之有(yǒu)效的(dí),安全(quán)的,可信的方法(fǎ)。假病毒通(tōng)常被用(yòng)於病毒(dú)與(yǔ)宿主細(xì)胞(bāo)間(jiān)相互(hù)關(guān)係檢測(cè),受體鑒(jiàn)定,中和抗(kàng)體效價評價及(jí)基因治療(liáo)等方(fāng)麵研究(jiū)。綜上所述假病毒(dú)用(yòng)來(lái)研究(jiū)是非(fēi)常方便快捷(jié)的(dí),因此(cǐ)假(jiǎ)病毒的保存是需要解(jiě)決的(dí)問(wèn)題之一(yī)。假病(bìng)毒用於檢測試劑(jì)的(dí)冷凍幹燥和(hé)貯藏(cáng)過(guò)程(chéng)中(zhōng),很(hěn)多(duō)因素如化學(xué)成(chéng)分,凍結速率,凍結(jié)和脫水應力,玻璃化轉(zhuǎn)變(biàn)溫度,幹燥(zào)固體(tǐ)中剩餘(yú)水分(fēn),貯(zhù)藏環(huán)境的(dí)溫(wēn)度(dù)和(hé)濕度等都會影響其中活性(xìng)組分(fēn)的穩(wěn)定性甚至(zhì)會導致失(shī)活。假病毒(dú)試劑,都(dū)需要添(tiān)加(jiā)合適(shì)的冷(lěng)凍幹燥(zào)保(bǎo)護劑和添加(jiā)劑,也就是所(suǒ)謂的凍(dòng)幹賦形劑,配(pèi)製成混合液(yè)後,才能進行有(yǒu)效(xiào)的冷凍幹燥(zào)和貯(zhù)藏。因(yīn)此(cǐ),凍幹的(dí)假病毒試劑(jì)檢測(cè)方(fāng)法的(dí)開(kāi)發,凍幹保(bǎo)護劑(jì)的開(kāi)發,
篩(shāi)選及有效(xiào)組合(hé),還(huán)有凍(dòng)幹工藝曲綫的方法(fǎ)開發(fā)及優化(huà)都(dū)是客(kè)觀存在(zài)且亟需解(jiě)決(jué)的(dí)問(wèn)題。假病毒(dú)全基因組(zǔ)質控品能(néng)從采樣(yàng)步驟開始質(zhì)控(kòng)檢測全流程(chéng),並(bìng)且(qiě)是(shì)穩定的凍幹珠形式(shì)。其(qí)他(tā)假病(bìng)毒(dú)也(yě)都可(kě)以(yǐ)做(zuò)成(chéng)凍幹(gān)粉,凍幹珠(zhū)的(dí)形(xíng)式。假(jiǎ)病毒(dú)凍(dòng)幹的方法和(hé)其(qí)他(tā)試劑樣本凍幹的原理(lǐ)都是差(chà)不(bù)多的,也要(yào)篩選(xuǎn)相應的保護劑(jì),凍(dòng)幹(gān)曲(qū)綫(xiàn)。各(gè)種靶基因(yīn)的(dí)假病毒都可(kě)以開(kāi)發成(chéng)凍幹形式進行保存(cún)或者配合試劑盒(hé)進(jìn)行使(shǐ)用,運(yùn)輸,貯存(cún)等。各種形式(shì)樣品凍幹技術(shù)開(kāi)發,凍幹配方開(kāi)發,凍幹曲(qū)綫開(kāi)發(fā),凍(dòng)幹(gān)樣(yàng)品評價生產放(fàng)大(dà)技術,各(gè)種微生(shēng)物(wù)凍幹(gān),製劑(jì)凍幹(gān),藥(yào)品(pǐn)凍(dòng)幹等。