蛋(dàn)白(bái)酶K是一(yī)種從(cóng)白色(sè)念(niàn)珠菌分離(lí)出來的(dí)強(qiáng)力(lì)蛋(dàn)白溶解(jiě)酶(méi)，具(jù)有很(hěn)高(gāo)的比(bǐ)活(huó)性，是DNA提(tí)取的(dí)關(guān)鍵試劑(jì)。該酶在(zài)較廣(guǎng)的pH範(fàn)圍（4〜12.5）內及高(gāo)溫 (50〜70°C)均有(yǒu)活性，用(yòng)於質粒或(huò)基(jī)因組(zǔ) DNA，RNA的分(fēn)離。在DNA提取中，主要作(zuò)用是酶解與核酸結合的組蛋(dàn)白(bái)，使 DNA遊(yóu)離在(zài)溶液中(zhōng)，隨後(hòu)用(yòng)不同方法進行抽(chōu)提(tí)，除去(qù)雜(zá)質，收集(jí)DNA。EDTA等螯(áo)合(hé)劑(jì)或(huò)SDS等(děng)去(qù)垢(gòu)劑均不(bù)能(néng)使之(zhī)失活。蛋白酶(méi)K貯存(cún)液一般(bān)為10mg/ml或20mg/ml。 貯存於(yú)-20°C。蛋白酶(méi)K在(zài)核酸(suān)純化(huà)，絲(sī)綢，醫藥，食品(pǐn)和(hé)釀造(zào)等領(lǐng)域都有著(zhuó)重(zhòng)要的應(yīng)用(yòng)。由於儲存和運輸需要低溫，而且反(fǎn)復凍(dòng)融對(duì)活(huó)性(xìng)也有影響，因此有必要開(kāi)發一(yī)種可以(yǐ)長期穩定保存蛋白酶K的方法。
冷凍幹燥(zào)技術是(shì)把含有(yǒu)水(shuǐ)分(fēn)的物(wù)料(liào)預*行(háng)降溫，凍(dòng)結(jié)成固體，在一定的真空條件下使冰升華(huá)，以(yǐ)水蒸氣(qì)形(xíng)式(shì)除去(qù)，通(tōng)過(guò)二(èr)次幹燥(zào)獲得低含(hán)水(shuǐ)量的固(gù)體幹(gān)燥物。
冷凍幹燥(zào)是(shì)在(zài)低溫，真空(kōng)狀態下完成對(duì)製(zhì)品(pǐn)的(dí)脫水幹(gān)燥過程的，相對於其他幹燥方(fāng)式具有很多(duō)優點(diǎn)，目(mù)前(qián)在生物製品(pǐn)，藥品(pǐn)的幹(gān)燥(zào)方法中是(shì)主要選擇。主要(yào)體(tǐ)現(xiàn)在以下(xià)幾個(gè)方麵：樣品(pǐn)預凍前完成(chéng)全(quán)體(tǐ)係的分裝，保證(zhèng)劑量的精(jīng)確性；低(dī)溫和(hé)真空下幹燥(zào)，保證(zhèng)物質(zhì)本身的理化(huà)性質和(hé)生物(wù)特性；固(gù)態(tài)的冰晶(jīng)升華成為(wéi)水蒸氣後形成的(dí)疏(shū)鬆(sōng)多(duō)孔(kǒng)結(jié)構(gòu)，凍(dòng)幹製品具(jù)有良好的速(sù)溶(róng)性，復水性；脫水(shuǐ)*，重(zhòng)量(liáng)輕，方便(biàn)儲(chǔ)存(cún)和運(yùn)輸，可以常溫(wēn)運(yùn)輸(shū)和儲存。
但(dàn)是由(yóu)於凍幹過程是(shì)一個復雜(zá)的(dí)相變(biàn)過(guò)程，蛋白(bái)酶K作(zuò)為(wéi)一(yī)種蛋白(bái)質(zhì)，在冷凍(dòng)幹(gān)燥(zào)過(guò)程中(zhōng)極易受(shòu)到凍幹過程的(dí)低(dī)溫效(xiào)應，凍(dòng)結(jié)效(xiào)應和脫(tuō)水(shuǐ)效應的(dí)影響(xiǎng)，最終導致(zhì)其酶活性的降低(dī)甚(shèn)至失(shī)活(huó)。因(yīn)此為了(liǎo)減少(shǎo)蛋白酶K酶活性在(zài)凍(dòng)幹過程(chéng)中(zhōng)的(dí)損傷，篩選合(hé)適的凍(dòng)幹(gān)保護劑和合適(shì)的凍(dòng)幹工藝(yì)尤為重要(yào)。
蛋白酶K常(cháng)用保護劑(jì)蔗(zhè)糖(táng)，海(hǎi)藻糖，甘露醇，右旋糖(táng)苷(gān)，肌(jī)醇，甘氨(ān)酸(suān)，L絲氨(ān)酸(suān)，α丙(bǐng)氨(ān)酸(suān)，PEG，BSA，EDTA，ca離子(zǐ)等。各種(zhǒng)保(bǎo)護劑可以相(xiāng)互(hù)組(zǔ)合(hé)或者采用單一組分(fēn)加合(hé)適的(dí)緩(huǎn)衝液等(děng)。不同的保護劑配方行成(chéng)的固(gù)形(xíng)物(wù)含量不(bù)一樣(yàng)，所(suǒ)以關(guān)鍵溫度不同(tóng)，采用的凍(dòng)幹工(gōng)藝技術(shù)路(lù)綫也不一(yī)樣。凍(dòng)幹(gān)工藝(yì)可(kě)以采用(yòng)一(yī)步(bù)升(shēng)華(huá)幹燥法，或者階(jiē)梯升溫幹燥(zào)法(fǎ)，具體的(dí)工(gōng)藝需要根據(jù)溶(róng)液的實際情況(kuàng)進行(háng)摸索。我(wǒ)公司供應凍幹機(jī)可(kě)以(yǐ)摸索凍幹工藝(yì)，助力篩選(xuǎn)凍(dòng)幹(gān)配方(fāng)，夠買凍(dòng)幹機(jī)提(tí)供(gōng)技術(shù)解(jiě)決(jué)方(fāng)案和技(jì)術協助，助(zhù)力項(xiàng)目開(kāi)發。
