RPA技術就(jiù)是重組(zǔ)酶聚合(hé)酶(méi)擴增(zēng)(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)，被稱(chēng)為是可(kě)以替代(dài)PCR的核酸(suān)檢(jiǎn)測技術。RPA技(jì)術(shù)主要依賴(lài)於(yú)三(sān)種酶：能結合(hé)單鏈核酸(寡核(hé)苷(gān)酸引物)的重(zhòng)組(zǔ)酶，單(dān)鏈DNA結合(hé)蛋白(SSB)和(hé)鏈(liàn)置換(huàn)DNA聚合酶。這三種酶的混(hùn)合物(wù)在(zài)常溫(wēn)下也有(yǒu)活(huó)性(xìng)，最佳(jiā)反應(yīng)溫度在(zài)37°C~40℃左(zuǒ)右(yòu)。
RPA的原理是：重(zhòng)組酶(méi)與引(yǐn)物(wù)結(jié)合(hé)形(xíng)成(chéng)的蛋(dàn)白-DNA復(fù)合物(wù)，能在雙(shuāng)鏈DNA中尋(xún)找同源序列。一(yī)旦引物(wù)定(dìng)位了同源序(xù)列(liè)，就會發(fā)生(shēng)鏈(liàn)交換反(fǎn)應(yīng)形成並(bìng)啟(qǐ)動DNA合成，對模板上的目(mù)標(biāo)區域進(jìn)行指(zhǐ)數式擴增(zēng)。被替(tì)換(huàn)的(dí)DNA鏈(liàn)與SSB結合，防止(zhǐ)進一步替換(huàn)。在這(zhè)個體(tǐ)係中，由兩個相(xiāng)對(duì)的引物(wù)起(qǐ)始(shǐ)一(yī)個合成(chéng)事(shì)件。RPA反應速(sù)度(dù)快(kuài)，用(yòng)時(shí)短(duǎn)，特異(yì)性強。
RPA凍(dòng)幹技(jì)術具(jù)有很多優點(diǎn)：
1，凍幹(gān)預分裝：避(bì)免反復(fù)凍融導致的試驗結(jié)果誤(wù)差，避(bì)免(miǎn)酶等(děng)粘(nián)稠(chóu)度高(gāo)的(dí)組(zǔ)份損(sǔn)耗；
2，常溫儲運(yùn)：*熱穩定(dìng)性，突破(pò)冷(lěng)鏈(liàn)瓶(píng)頸，釋放(fàng)冷(lěng)庫空間，減(jiǎn)少儲運(yùn)成本；
3，快速(sù)檢測 15min進行(háng)單分(fēn)子(zǐ)檢(jiǎn)測試(shì)驗(yàn)。
4，包(bāo)裝(zhuāng)形式簡(jiǎn)單(dān)，直(zhí)接(jiē)使(shǐ)用，對(duì)人(rén)員操(cāo)作(zuò)要求降低(dī)，不需(xū)要專業的(dí)配(pèi)液操作(zuò)人員(yuán)。
5， 可(kě)以(yǐ)選擇包(bāo)材形式多樣(yàng)化(huà)，能(néng)夠降低生(shēng)產(chǎn)成(chéng)本(běn)。
6，無需(xū)熱(rè)循環(huán)過(guò)程(chéng)，不(bù)需(xū)要(yào)配置配(pèi)套(tào)的(dí)設備來(lái)進(jìn)行反(fǎn)應的準備(bèi)。
7，可(kě)批量生(shēng)產(chǎn)，快速高(gāo)效，特異。
針對RPA試(shì)劑的(dí)和(hé)LAMP及其他核酸試(shì)劑(jì)的(dí)特點(diǎn)，開(kāi)發針對性(xìng)的凍(dòng)幹保護劑(jì)配方，設計合(hé)理的(dí)凍(dòng)幹(gān)曲綫，獲得(dé)各(gè)種(zhǒng)凍(dòng)幹(gān)形(xíng)式的(dí)RPA凍(dòng)幹(gān)試(shì)劑(jì).公司的(dí)Pilot T係(xì)列(liè)可(kě)以針(zhēn)對該試劑進(jìn)行(háng)凍幹，匹配(pèi)度高(gāo)，穩(wěn)定(dìng)性和(hé)可靠性好，適用(yòng)範圍(wéi)廣，針對(duì)溫度(dù)和(hé)光(guāng)敏感型(xíng)物料(liào)設(shè)計(jì)，功(gōng)能齊全。係(xì)列凍幹機可以做(zuò)成(chéng)RPA凍(dòng)幹球(qiú)和(hé)凍(dòng)幹粉，適(shì)用西(xī)林瓶，離心(xīn)管，芯(xīn)片盤，托盤，安(ān)瓿瓶(píng)，PCR八連管等(děng)各種(zhǒng)容(róng)器(qì)。
Pilot T係列(liè)全功能(néng)自動凍幹(gān)機技術(shù)參數(shù)
型(xíng)號 | Pilot1-2T | Pilot2-4T | Pilot4-6T | Pilot5-8T | Pilot8-12T | Pilot10-15T |
凍(dòng)幹(gān)麵(miàn)積(jī) | 0.1㎡ | 0.2㎡ | 0.42㎡ | 0.56㎡ | 0.84㎡ | 1.05㎡ |
∅22西(xī)林(lín)瓶裝量(liáng)（20ML） | ≥210支(zhī) | ≥400支(zhī) | ≥900支(zhī) | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
∅16西林瓶(píng)裝量(liáng)（5ML） | ≥410支 | ≥800支 | ≥1700支(zhī) | ≥2210支 | ≥3100支 | ≥4100支 |
冷阱溫(wēn)度（空載(zǎi)） | -85℃ |
真(zhēn)空度(dù)（空載(zǎi)） | ≤1Pa |
板層溫(wēn)度(dù)（空(kōng)載(zǎi)） | -55℃ |
板層製冷方式(shì) | 矽(guī)油循環(huán) |
板層(céng)數量(liáng) | 1+1 | 2+1 | 3+1 | 4+1 | 4+1 | 5+1 |
板(bǎn)層尺(chǐ)寸（mm） | 375*270 | 375*270 | 350*400 | 350*400 | 350*600 | 350*600 |
捕(bǔ)水能(néng)力(lì) | 2L | 4L | 6L | 8L | 12L | 10L |
凍幹(gān)效率 | 2L/24H | 4L/24H | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板層間(jiān)距 | 130mm | 80mm | 100mm | 80mm | 90mm | 100mm |
穿牆(qiáng)隔(gé)離(lí) | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
凍(dòng)幹(gān)曲(qū)綫(xiàn)擬合(hé)度 | 100% | 100% | 100% | 100% | 100% | 100% |
晶型(xíng)控製 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
蒸(zhēng)汽(qì)分(fēn)壓(yā)控製 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
升華(huá)結(jié)束(shù)判(pàn)定(dìng) | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
凍幹終點測試(shì) | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
壓塞 | 液(yè)壓 |
整(zhěng)機(jī)尺(chǐ)寸 （約） | W660*D1200*H1500 | W660*D1200*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1700*H1900 | W860*D1700*H1900 |
